本发明涉及制造培养肉的。更具体地，涉及用于制造培养肉的细胞增殖用培养基(细胞生长用培养基)、该培养基的制造方法、用于制造培养肉的细胞的制备方法、以及用于制造培养肉的细胞增殖促进剂(细胞生长促进剂)。
1、到目前为止，肉食的生产是通过饲养家畜进行的。另一方面，家畜的饲养需要大量的谷物和水，需要广阔的饲养场。近年来，出现了气候变化和食品不足的问题，希望环境负荷更低，生产效率高的可持续的肉食生产。其中，作为新的肉食生产方法，从细胞生产培养肉的研究开发备受瞩目。
2、作为肉食的替代品，已知有植物来源的代用肉，但其口感和味道不及肉食。另一方面，对于培养动物细胞的培养肉来说，能够达到接近本来肉食的口感和味道，并且与肉食相比，具有细菌和病毒污染的风险低的优点。从技术上来说，培养肉的制造已经成为可能。但是，迄今为止的培养肉的制造中使用的细胞培养基是利用在基础研究或医药品应用中使用的大规模培养技术，从其成本和作为肉食的安全性的方面考虑，难以用于食品的制造。对于基础研究和医药品应用中使用的细胞培养基来说，一般是在含有氨基酸、维生素、无机盐和葡萄糖等碳源的基础培养基中，添加胎牛血清(fbs)作为添加成分(非专利文献1：molther.2004mar；9(3)：475-82)。另一方面，fbs是从胎儿采集的血清，因此难以大量获得，同时在价格、运输成本、感染症风险以及动物爱护方面存在课题。为了解决这样的课题，开发了将必要成分fbs作为试剂补充的完全合成培养基(非专利文献2：the canadian journalof chem engineering vol.94，(10)october 2016 1855-1862)。但是，在这样的完全合成培养基中，使用了重组蛋白、激素、血清来源成分等，作为食品使用存在课题。
3、作为用于制造培养肉的细胞培养基，已经尝试了各种制造方法。可举出：利用脏器细胞的生成物的培养基(专利文献1：专利第6111510号公报)、利用藻类生成物的培养基(非专利文献3：scient ific reports.jan31；7：41594)、利用食品残渣的水解物的培养基(非专利文献4：food funct.2020，11，2477-2488)、利用其他食品原料成分的培养基(专利文献2：国际公开第2021/148955号)等。
2、本发明的目的在于，通过添加食品原料成分作为细胞增殖促进剂，提供可大量培养细胞的培养基，所述细胞用于制造培养肉。
4、本发明人等对可用于制造培养肉的培养基进行了深入研究，结果发现，通过将乳清作为细胞增殖促进剂添加到培养基中，能够实现成为培养肉原料的细胞的高增殖活性，从而完成了本发明。
6、[1]细胞增殖用培养基，其包含基础培养基和作为细胞增殖促进剂的乳清。
7、[2]如项目[1]所述的培养基，其中，增殖的细胞是用于制造培养肉的细胞。
8、[3]如项目[1]或[2]所述的培养基，其中，所述培养基不含动物来源血清。
9、[4]如项目[3]所述的培养基，其中，所述动物来源血清是胎牛血清(fbs)。
10、[5]如项目[1]～[4]任一项所述的培养基，其中，所述细胞包含选自成纤维细胞、脂肪组织来源细胞和肌肉组织来源细胞中的至少1种细胞。
11、[6]如项目[5]所述的培养基，其中，所述脂肪组织来源细胞是选自脂肪干细胞、多泡脂肪细胞和单泡脂肪细胞中的至少1种细胞。
12、[7]如项目[5]所述的培养基，其中，所述肌肉组织来源细胞是选自成肌细胞和肌卫星细胞中的至少1种细胞。
13、[8]如项目[1]～[7]任一项所述的培养基，其中，所述细胞是牛来源的细胞。
14、[9]如项目[1]～[8]任一项所述的培养基，其还含有食品原料成分。
15、[10]如项目[9]所述的培养基，其中，食品原料成分选自蛋清(蛋青)、大豆、鱼粉和小麦粉。
16、[11]制备用于制造培养肉的细胞的方法，其包括在培养基中培养细胞的工序，所述培养基包含基础培养基和作为细胞增殖促进剂的乳清。
17、[12]如项目[11]所述的方法，其中，所述培养基不含动物来源血清。
18、[13]如项目[12]所述的方法，其中，所述动物来源血清是胎牛血清(fbs)。
19、[14]如项目[11]～[13]任一项所述的方法，其中，所述培养基还含有食品原料成分。
20、[15]如项目[14]所述的方法，其中，所述食品原料成分选自蛋清、大豆、鱼粉和小麦。
21、[16]如项目[11]～[15]任一项所述的方法，其中，所述细胞是牛来源的细胞。
22、[17]如项目[11]～[16]任一项所述的方法，其中，所述细胞包含选自成纤维细胞、脂肪组织来源细胞和肌肉组织来源细胞中的至少1种细胞。
23、[18]如项目[17]所述的方法，其中，所述脂肪组织来源细胞是选自脂肪干细胞、多泡脂肪细胞和单泡脂肪细胞中的至少1种细胞。
24、[19]如项目[17]所述的方法，其中，所述肌肉组织来源细胞是选自成肌细胞和肌卫星细胞中的至少1种细胞。
25、[20]如项目[19]所述的方法，其中，所述细胞是成肌细胞或肌卫星细胞，所述方法还包括将成肌细胞或肌卫星细胞诱导分化为肌管细胞的工序。
26、[21]培养肉的制造方法，其包括聚集通过项目[11]]～[20]任一项所述的方法制备的细胞的工序。
27、[22]如项目[21]所述的制造方法，其特征在于，将所述制备的细胞与选自其他细胞、血液、组织和细胞外基质中的至少1种物质一起聚集。
28、[23]如项目[22]所述的制造方法，其中，所述其他细胞是从培养细胞或动物中获得的细胞。
29、[24]如项目[21]～[23]任一项所述的制造方法，其包括在聚集后进一步培养。
31、[26]如项目[25]所述的细胞增殖促进剂，其用于添加到不含动物来LONG8官方入口源血清的培养基中。
32、[27]如项目[25]或[26]所述的细胞增殖促进剂，其用于促进选自成纤维细胞、脂肪组织来源细胞和肌肉组织来源细胞中的至少1种细胞的增殖。
33、[28]如项目[27]所述的细胞增殖促进剂，其中，所述脂肪组织来源细胞是选自脂肪干细胞、多泡脂肪细胞和单泡脂肪细胞中的至少1种细胞。
34、[29]如项目[27]所述的细胞增殖促进剂，其中，所述肌肉组织来源细胞是选自成肌细胞和肌卫星细胞中的至少1种细胞。
35、[30]如项目[25]～[29]任一项所述的细胞增殖促进剂，其中，所述细胞是牛来源的细胞。
37、将基础培养基和作为细胞增殖促进剂的乳清混合，获得细胞增殖用培养基的工序；和
39、[32]如项目[31]所述的方法，其中，所述加热杀菌的工序通过煮沸处理进行。
40、[33]如项目[31]所述的方法，其中，所述加热杀菌工序通过板式热交换器或蒸汽清洗装置进行。
42、通过向基础培养基中添加乳清，可以提供促进细胞的细胞增殖活性的细胞培养基。
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