要骑手戴头套，戴口罩，戴手套， 另外可用百分之七十的酒精处理手机操作界面，首先我们取小鼠，将小鼠拉近除死，植入百分之七十的酒精浸泡杀菌。 在一道超紧工作台中无尽环境。取出小手放在操作盘中，用手术器械逐层分离皮肤肌肉组织层，打开腹腔和胸腔， 注意不同的结合层次，使用不同的消毒器械。最后取出心脏和肝脏 之一，武警平米内用汉克森也洗三次。第二步是结力组织，用弯头剪，分别把心脏和肾脏组织剪碎， 每个组织块大有一立方毫米左右，用汗水洗涤两到三次，自然成浆，用吸管吸取上新星级组织我们采用组织块法，也就是将剪翠的组织块中加入 零点一到一毫升的培养机，其其组织款悬液转入细胞培养品中，尽量让组织款铺展开，在三十七度培养箱内放置两到三个小时，待组织款牢牢贴 一评比之后，然后再沿着评比补加培养机到三到五毫升。三十七度二氧化碳培养箱内禁止培养对肝脏组织，我们采用消化法，将肝脏组织放入培养敏中， 加入一到两毫升百分之零点二五的一蛋白酶，消化五到七分钟，再加入一毫升培养机终止消化。 用滤网过滤，取过滤液移入是否还是泥管中， 再加 p b s 到十毫升，混匀一千转，逆行五分钟，然后收集细胞，用 p b s 离心洗涤两次气上氢，然后加入培养机五毫升，根据细胞的 密度，然后我们转入细胞培养瓶中补充培养机到五毫升。在三十七度二氧化碳培养箱内，禁止培养 元代培养细胞的显微观察，我们每天要用倒置显微镜观察细胞的生长状态，直接去除老培养机，加适量的 pps 洗涤细胞，两次 去 pps， 然后加入一到两毫升百分之零点二五的乙蛋白酶消化细胞。我们可以在显微镜下观察细胞，细胞会逐渐从屏蔽上分离变圆， 我们加入带有血清的培养机，可以终止消化。然后用液气或者是滴管洗 取胚芽液，将细胞从屏蔽上吹下来获得的细胞悬液。注意在吹打细胞时要尽量不要产生气泡。 第三步是细胞激素，我们取细胞血液液，二十维生加入六十维生台盘蓝软液混匀。取十到十五分的细胞加入细胞板内，在显微镜下进行观察， 然后对细胞血液进行离心一千转五分钟。第四步是根据细胞激素的结果，我们加入培养机调整细胞的密度。第五步是分频，也就是取一定量的细胞血液 加入到新的细胞培养品中，添加新鲜培养机三到五毫升混匀。最后把细胞培养品放置到二氧化碳培养箱中静置培养。
哈喽，同学们，我是陪大家用点滴时间学习生物的周周老师，今天啊，我们来梳龙8娱乐平台理一下动物细胞工程的知识。 动物细胞工程这里呢有三门技术，分别是动物细胞培养、动物细胞融合和动物体细胞合一值。 而这三门技术啊，他又对应着三个重要的应用，分别是干细胞培养，单克隆抗体的制备以及克隆动物。 下面我们就一起来看一下吧。先来看最基础的动物细胞培养，很多同学容易把他和前面咱们学过的植物组织培养混为一谈，但是他们之间啊，其实是有明显区别的。 第一呢，就是我们知道植物组织培养，他培养的是离体的细胞组织器官，也就是外植体，但是对于动物细胞培养来说，他培养的 只能是细胞，也就是说，我们在获取了动物的相关组织之后，要先将它分散成单个的细胞，然后才能在适宜的条件下进行培养。 那么第二呢，就是咱们知道植物组织培养它的原理是细胞的全能性，所以我们最终得到的是啊完整的植株，但是对于动物细胞来说，它是没有全能性的，所以啊，我们最终培养的结果呢，也是细胞的不断的生长和增值， 所以它的原理对应的是啊细胞的增值。下面我们就来看一下动物细胞在体外增值需要哪些条件。首先呢，就是啊营养条件，科学家啊，根据动物细胞他所需要的营养的种类和比例，严格的配置成了合成培养机，但是呢，由于我 目前研究还不够充分，所以呢，也会加入血清等天然成分，以保证充足的营养。那么除了营养条件之外，动物细胞还需要一个无菌无毒的环境，这就要求我们对所有的器具进行灭菌操作，而且保证全程的无菌操作。 除此之外，还需要定期更换营养液，因为在营养液当中呢，可能会有大量的动物细胞产生的代谢废物，这些是对细胞有毒害作用的。 动物细胞的生长他还需要适宜的温度， ph 以及渗透压。咱们知道，对于大多数的哺乳动物来说，他的适宜温度指的就是三十六点五上下零点五摄氏度的一个浮动。那么 ph 呢？就是啊， 七点二到七点四之间。除此之外，动物细胞啊，他还需要一个适宜的气体环境，主要是有二氧化碳和氧气， 咱们知道氧气是细胞代谢所必须的，那么二氧化碳呢，它主要用来维持培养液的撇一次，所以啊，我们一般会把动物细胞放到百分之九十五的空气，加上百分之五的二氧化碳组成的二氧化碳培养箱当中去培养。 接下来啊，我们就来看一下具体的培养过程。首先呢，就是将动物的组织分散成单个的细胞，可以用机械的方法把它剪碎，也可以用酶来进行处理，常用的酶同学们注意一下，一个是一蛋白酶或者是胶原蛋白酶，接下来 那我们就可以用培养液把细胞制成细胞悬液，然后放到培养米或者是啊培养瓶当中进行培养。在体外培养的动物细胞啊，主要有两种，一种呢它是可以悬浮到培养液当中去生长的， 而另外一类呢，则是需要吸附到某些机制的表面才能够进行生长和增值的。而大多数的动物细胞啊，都是咱们说到的第二种，也就是说他需要贴附到培养屏的表面，这种现象呢，就称为细胞贴壁。 那么贴壁生长的细胞，当它生长到表面相互接触的时候，它的生长往往就会停止，这种现象就叫做接触抑制。当接触抑制现象出现之后呢，我们就需要把它 进行分瓶处理。哎，这个地方分瓶的话看一下啊，用的还是刚才咱们提到的胶原蛋白酶和一蛋白酶，其实就是为了把它再分散成单个细胞，放入培养瓶当中继续培养。这个分瓶操作啊，其实是一个分水岭， 在分屏之前呢，我们称为元代培养，在分屏之后称为传代培养。 接下来我们再来看一下动物细胞培养他的应用，哎，最主要的就是干细胞培养了，那么根据来源的不同，干细胞啊，可以分为胚胎干细胞和成体干细胞。 先来看胚胎感细胞，它也简称为 es 细胞，顾名思义，它就是来自于早期胚胎，它具有发育的全能性，所以可以分化成任何一种细胞，组织、器官， 甚至有发育成个体的潜能。而成体干细胞呢，就是成体的组织或者器官里的干细胞了，比如我们熟悉的造血干细胞、神经干细胞等等，它具有组织特异性，只能发育成特定的组织和细胞。 除了这两种以外啊，科学家还诱导成功了一类类似于胚胎干细胞的诱导多能干细胞，哎，简称为 ips 细胞，那么他呢，可以诱导形成多种细胞，而且啊又不存在伦理问题，所以应用前景更加广泛。 好啦，动物细胞培养啊，咱们就说这么多，下面呢，来看一下动物细胞融合这项技术啊，类似于前面咱们学过的植物体细胞杂交，就是把两个或者是 多个的动物细胞结合成一个细胞的技术，所以他的原理也是细胞膜的流动性，他也突破了有性生殖的局限，让远远杂交成为了可能。 那么不过因为少了细胞 b， 所以啊，少了去 b 这个操作，它就更简单了，而且在诱导方法上，除了咱们学过的 p e g。 融合法和电容合法之外，还可以用灭火的病毒进行诱导动物细胞融合呢，它也只能最终到细胞水平。 那么最著名的一个应用啊，就是利用杂交流细胞来制备单克隆抗体了，所谓的这个杂交流细胞，它其实是由浆细胞，也就是效应 b 细胞和骨髓瘤细胞融合形成的，所以呢，它既能分泌特异性抗体，又能无限增值。 那么具体的过程是什么样的呢？我们接下来一起来看一下。首先啊，就是用特定的抗原对小鼠进行免疫，这样就能从小鼠的皮当中得到能产生特定抗体的 b 淋巴细胞，哎，也就是将细胞同时还要培养骨髓瘤细胞。 接下来呢，就是利用各种方法去诱导他们融合，我们想得到的结果呢，当然是能够得到效应弊细胞和杂交流细胞的融合了， 但是啊，在实际的操作过程中，可能呢会出现没有融合的细胞，也可能会出现相同细胞融合的情况，所以啊，接下来就要在选择培养机上进行筛选， 这种培养机上呢，未融合的细胞或者是啊相同细胞融合都会死亡，只有杂交流 细胞才能够生长，这些杂交流细胞啊，它既能大量增值，又能产生抗体，不过它产生的抗体是不是我们所需要的呢？哎，这时候啊，就要进行克隆化培养和抗体检测了， 如果抗体检测呈阳性，那么就说明他分泌的是我们需要的抗体，也就是我们需要的杂交流细胞。接下来啊，就可以在体外大规模培养，或者呢也可以注射回小鼠的腹腔当中进行增值。 好啦，以上呢，就是单克隆抗体之辈的全过程了。最后啊，我们来看一下动物体细胞核移植技术，那么咱们知道，对于动物来说，一个细胞是没有全能性的，但是它的细胞核是具有全能性的，所以啊，我们可以 想办法通过把动物的一个细胞的细胞核移植到去核的细胞当中，这样呢就可以形成一个重组细胞，接下来把它培养发育成重组的一个胚胎，进而形成完整的一个动物个体，这就是克隆动物的产生了。 那么这里要注意了，接受细胞核的这个细胞啊，他很特殊，我们一般会选择处于减数第二次分裂的卵母细胞， 原因有三个，首先呢是因为这个细胞他比较大，我们容易操作。第二咱们知道软木细胞呢，他的卵黄多，营养丰富，可以为发育提供充足的营养。 再有就是对于卵母细胞来说，他的细胞质当中呢，具有促使细胞和全能性表达的物质，那具体的过程是怎么样的呢？ 下面啊，我们就通过克隆牛的例子来看一下。首先啊就是卵母细胞的一个收集和培养，我们一般会在屠宰场当中去收集牛的卵巢，采集里面的卵母细胞，并在体外把它培养到减数，第二次分裂，然后通过显微操作把核去掉。 同时呢，我们也会收集供体牛，也就是高产牛它的体细胞，然后将供体细胞呢注入到去核的卵母细胞当中， 再通过电融合的方法使细胞融合，然后呢形成重构胚。接下来啊，就涉及到胚胎工程的一些操作了，我们会用物理或者是化学的方法来激活重构胚，然后让他开始生长发育，在适宜的时候 移植到瘦体母牛，也就是代孕母牛的体内，直到生出小牛。关于胚胎工程的这一部分内容啊，我们会在下节课给大家详细介绍，下面我们来重点关注一下这头小牛， 我们一般会说他主要像供体母牛，有一点呢会像提供卵母细胞的母牛，但是和他的代孕妈妈是没有丝毫关系的，因为它的主要遗传物质是由供体母牛的细胞核来提供。 那么去核的卵母细胞质当中呢，有一定的细胞至今也可以控制一部分遗传特征，但是与瘦体母牛，也就是代孕妈妈是完全没有关系的啦。好啦，以上啊就是动物细胞工程的全部内容了，三年并且在 在评论区扣六就可以领取到 pdf 版的精华总结啦，最后还是祝大家高考圆梦，拜拜！
浙大学姐手把手教你养细胞-超详细版