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科研进展

常用的五种动物细胞培养方式

常用的五种动物细胞培养方式

  

常用的五种动物细胞培养方式(图1)

   一、 半连续式培养 1 .半连续式培养又称为重复分批式培养或换液培养。 采用机械搅拌式生物反应器系统, 悬浮培养形式。 在细胞增长和产物形成过程中, 每间隔一段时间, 从中取出部分培养物, 再用新的培养液补足到原有体积, 使反应器内的总体积不变。 这种类型的操作是将细胞接种一定体积的培养基, 让其生长至一定的密度, 在细胞生长至最大密度之前, 用新鲜的培养基稀释培养物, 每次稀释反应器培养体积的 1 /2~3/4, 以维持细胞的指数生长状态, 随着稀释率的增加培养体积逐步增加。 或者在细胞增长和产物形成过程中, 每隔一定时间, 定期取出部分培养物, 或是条件培养...

   一、 半连续式培养 1 .半连续式培养又称为重复分批式培养或换液培养。 采用机械搅拌式生物反应器系统, 悬浮培养形式。 在细胞增长和产物形成过程中, 每间隔一段时间, 从中取出部分培养物, 再用新的培养液补足到原有体积, 使反应器内的总体积不变。 这种类型的操作是将细胞接种一定体积的培养基, 让其生长至一定的密度, 在细胞生长至最大密度之前, 用新鲜的培养基稀释培养物, 每次稀释反应器培养体积的 1 /2~3/4, 以维持细胞的指数生长状态, 随着稀释率的增加培养体积逐步增加。 或者在细胞增长和产物形成过程中, 每隔一定时间, 定期取出部分培养物, 或是条件培养基, 或是连同细胞、 载体一起取出, 然后补加细胞或载体, 或是新鲜的培养基继续进行培养的一种操作模式。 剩余的培养物可作为种子, 继续培养, 从而可维持反复培养, 而无需反应器的清洗、 消毒等一系列复杂的操作。 在半连续式操作中由于细胞适应了生物反应器的培养环境和相当高的接种量, 经过几次的稀释、 换液培养过程, 细胞密度常常会提高。 2.半连续式特点: 培养物的体积逐步增加; 可进行多次收获; 细胞可持续指数生长, 并可保持产物和细胞在一较高的浓度水平, 培养过程可延续到很长时间。 该操作方式的优点是操作简便, 生产效率高, 可长时期进行生产, 反复收获产品, 可使细胞密度和产品产量一直保持在较高的水平。 在动物细胞培养和药品生产中被广泛应用。 二、 连续式培养 1 .连续式培养是一种常见的悬浮培养模式, 采用机械搅拌式生物反应器系统。 该模式是将细胞接种与一定体积的培养基后, 为了防止衰退期的出现, 在细胞达最大密度之前, 以一定速度向生物反应器连续添加新鲜培养基; 同时, 含有细胞的培养物以相同的速度连续从反应器流出, 以保持培养体积的恒龙8定。 理论上讲, 该过程可无限延续下去。